當心，使用流動相注意這些事了嗎

流動相 | 保質期

各位老師知道流動相的保質期有多久嗎，經常遇到有老師前來咨詢“咱們的流動相能放多久啊，放一星期沒事吧”。但是老師，您知道嗎，流動相放的時間太長，可是會直接影響您的實驗結果呢。在這里就給各位老師說道說道流動相的注意事項。

一：流動相的貯存

流動相一般貯存于玻璃、聚四氟乙烯或不銹鋼容器內，不能貯存在塑料容器中。因許多有機溶劑如甲醇、乙酸等可浸出塑料表面的增塑劑，導致溶劑受污染。這種被污染的溶劑如用于HPLC系統，可能造成柱效降低。貯存容器一定要蓋嚴，防止溶劑揮發引起組成變化，也防止氧和二氧化碳溶入流動相。

磷酸鹽、乙酸鹽緩沖液很易長霉，應盡量新鮮配制使用，不要貯存。如確需貯存，可在冰箱內冷藏，用前應重新濾過。容器應定期清洗，特別是盛水、緩沖液和混合溶液的瓶子，以除去底部的雜質沉淀和可能生長的微生物。

二：流動相放置時間的影響

01 有機相揮發：有機試劑組成比例越大，沸點越低，其揮發程度越大，不過對于揮發相對比較好控制，只要密封好就可以；

02 pH值影響：反相色譜流動相往往是緩沖鹽，其pH值受有機相的揮發、空氣中的二氧化碳等影響，有時甚至渾濁；且不同pH值及不同緩沖鹽其受影響程度不同；

03 微生物影響：水相體系時間久了，往往會致生微生物，特別受光照等影響，因此，往往在棕色瓶中儲存；另外，如果流動相中有機相比例越大，其越不容易致生微生物；所以根據儲存條件及有機相比例不同其有效期不同。

所以各位老師要注意了，液相流動相建議12小時以后和瓶子一起更換的，純有機相建議12小時抽濾，24小時以后帶瓶子一起更換。流動相溶液忌微生物超標，各種菌會導致柱子堵，而產生很多不良影響。我們都知道，室溫如果高了，純水相上午配的下午下班時候都有可能會有微生物繁殖，都需要重新過濾。所以，純水相要現配現用，別抱僥幸心理偷懶不配，結果誤差大的話，隨時可能讓你返工哦。

三：流動相使用前要用過濾和脫氣

流動相使用前用0.45μm濾膜過濾、脫氣，清除微粒和灰塵。在送液泵內，為了防止雜物（固體）進入流路，裝有吸濾器，但網孔徑為10μm，比此更小的顆粒仍然可通過，這會導致流路和柱子堵塞和污染。為此，建議常用0.45μm濾膜過濾。流動相溶劑須經脫氣，如不脫氣，在溶劑混合時，或壓力溫度變化時容易產生大量氣泡，會導致泵誤動作和輸液不暢，檢測器產生噪聲信號等。

四：流動相需要恢復到室溫下使用

流動相恢復到室溫后使用。流動相溫度與室溫相差時，流動相在恢復到室溫前，基線水平很難穩定，特別是發生漂移，也容易產生氣泡等現象。水與有機溶劑混合時，混合液變化大，往往會與室溫相差很大，務必注意。

五：避免使用帶有腐蝕性流動相

流動相含有濃硫酸、濃硝酸、二氯乙suan、二氯甲烷、丙酮、四氫呋nan、二甲亞砜等溶劑，會對流路中的PEEK樹脂管路強度變差、PEEK樹脂管容易破裂使溶劑外濺。流動相含有鹵素離子的溶劑，如KCl、NaCI、NH₄CI等。對流路中的不銹鋼材料有腐蝕作用，以上的溶劑須盡量避免使用。非用不可時，分析完了后，應立刻用蒸餾水把全流路清洗干凈。

六：在流動相中加入有機試劑后測量pH值

所謂的pH值，是基于水為溶劑的體系才叫pH值，所以正確的調節緩沖溶液pH值的做法是在水溶液中進行。如果添加了有機溶劑后再測量pH值，這其實與添加之前測量的pH值會有所不同。

然而，重要的一點是操作習慣要保持一致。如果習慣是在添加有機溶劑之后測量pH值，那只要確保每次的操作都是如此就可以了。雖然這樣操作不是100%的準確，但至少它與之前的做法是一致的。這對于一個完整的研究來說，相較之你在添加有機溶劑之前測量pH值而獲得了一次準確的數據來說，保持一致的操作方法可能會更重要。

七：不要將流動相試劑瓶中的

流動相*用光

假如流動相準備的不夠充足，除了存在一定的泵和色譜柱空運行的風險外，還會有其它的問題存在。如由于溶液中水會從試劑瓶的上方蒸發，所以試劑瓶頂部流動相的成分已經發生了改變。如果使用了瓶中后這部分試劑，事實上它們就是原來試劑瓶中頂部的那部分，當它們通過色譜柱時可能會有渣滓滯留在色譜柱中。

八：使用超聲給流動相脫氣

超聲法對于確保所用的緩沖鹽*溶解很有效，但它不是z有效的脫氣方法，而且由于超聲時溶液會快速升溫而導致流動相中有機試劑蒸發。為了節省時間，可以花5min時間通過真空過濾機來過濾流動相，這可以一步達到脫氣和過濾的兩個目的。