嘔吐毒素的危害與檢測

嘔吐毒素(vomitoxin)，又稱脫氧雪腐鐮刀菌烯醇(DON)，化學名為3α, 7α, 15一三羥基草鐮孢菌-9-烯-8-酮，屬于單端孢霉烯族化合物，主要由禾谷鐮刀菌、尖孢鐮刀菌、串珠鐮刀菌、擬枝孢鐮刀菌、粉紅鐮刀菌、雪腐鐮刀菌等鐮刀菌產生。另外，頭孢菌屬、漆班菌屬、木霉屬等的菌株都可產生該毒素。單端孢霉烯族毒素共有150多種，是一類強有力免疫抑制劑，所引起典型癥狀是采食量降低，所以這類毒素又叫飼料拒食毒素。嘔吐毒素是其中最重要一種毒素，主要來自鐮刀菌屬，尤其是禾谷鐮刀菌和黃色鐮刀菌由于它可以引起豬的嘔吐，故又名嘔吐毒素。

嘔吐毒素被列為3類致癌物。它們具有很高的細胞毒素及免疫抑制性質，因此，對人類及動物的健康構成了威脅，特別是對免疫功能具有明顯的影響。DON廣泛存在于全球，主要污染小麥、大麥、玉米等谷類作物，也污染糧食制品，當人攝入了被DON污染的食物后，會導致厭食、嘔吐、腹瀉、發燒、站立不穩、反應遲鈍等急性中毒癥狀，嚴重時損害造血系統造成死亡。由于中國傳統飲食習慣中糧谷比例大大高于西方，使得嘔吐毒素的危害更為突出。谷物及飼料中DON的含量有嚴格的*。我國谷物中DON的*為1.0 mg/kg。

我國用于檢測嘔吐毒素的液相色譜法，常常會利用嘔吐毒素（脫氧雪腐鐮刀菌烯醇）免疫親和柱，免疫親和柱可選擇性吸附樣品液中的脫氧雪腐鐮刀菌烯醇，從而對脫氧雪腐鐮刀菌烯醇起到非常針對性的純化作用。

利用抗原抗體反應，抗體連接在柱體內，樣品經過提取、過濾后，緩慢的通過脫氧雪腐鐮刀菌烯酵免疫親和層析柱，在免疫親和柱內毒素與抗體結合，之后洗滌免疫親和柱除去沒有被結合的其他無關物質，再用甲醇洗脫，然后用于檢測。過凈化柱后可直接用于液相脫氧雪腐鐮刀菌烯醇含量的檢測，可提高檢測方法的準確度，達到快速測定的目的。

參考標準《GB 5009.111-2016 食品安全國家標準 食品中脫氧雪腐鐮刀菌烯醇及其乙酰化衍生物的測定》 ，月旭嘔吐毒素(脫氧雪腐鐮刀菌烯醇) DON免疫親和柱完成符合標準要求。以面粉為樣品，采用月旭嘔吐毒素(脫氧雪腐鐮刀菌烯醇) DON免疫親和柱凈化，然后進行檢測。

回溫：將免疫親和柱從低溫條件下取出后，恢復至室溫，將柱內液體放出；

上樣：待凈化液全部上樣，棄去；

淋洗：5mL磷酸鹽緩沖液，5mL水，棄去，抽干柱子；

洗脫：加入2mL甲醇洗脫，抽干柱子；

濃縮：將洗脫液置于 50℃水浴中氮吹至干，用20%甲醇水定容至1mL，用0.22μm濾膜過濾，上機測定。

色譜柱：月旭Ultimate^® XB-C18 4.6×150mm，5μm；

流動相：水：甲醇(80:20)；

流速：1.0mL/min；

柱溫：30℃；

進樣量：20μL；

波長：218nm 。

回收率結果如下圖：

圖一：面粉樣品空白圖譜