高純度RNase A純化工藝方案分享

核糖核酸酶A

核糖核酸酶A（Ribonuclease A，縮寫(xiě)RNase A），是一種含4個(gè)二硫鍵的單鏈多肽，分子量約為13.7kDa（氨基酸序列）。RNase A是一種核糖核酸內(nèi)切酶（endoribonuclease）。

核糖核酸酶層析純化思路

提取及粗純方案

我們基本采用牛胰腺硫酸銨鹽析粗提物（由McDonald根據(jù)Kunitz氏純化方法修改，“Methods in Enzymology"，Vol.ⅡP429，1955.）。

結(jié)論：

通過(guò)對(duì)牛胰腺鹽析粗提物處理，上樣CM Tanrose 6FF進(jìn)行RNase A的分離純化，其純度得到了很大的提升，去除了較多的雜蛋白，經(jīng)后續(xù)一定的處理后，跑SDS-PAGE膠，凝膠成像儀分析顯示單一條帶，符合純化要求。