凝膠過(guò)濾色譜中的瓊脂糖凝膠

基于凝膠過(guò)濾色譜的原理，對(duì)其介質(zhì)的最基本的要求是不能與原料組分發(fā)生除排阻之外的任何其他相互作用，如電荷作用、化學(xué)作用、生物學(xué)作用等。理想的凝膠過(guò)濾介質(zhì)具有高物理強(qiáng)度及化學(xué)穩(wěn)定性，能夠耐受高溫高壓和強(qiáng)酸強(qiáng)堿，具有高化學(xué)惰性，內(nèi)孔徑分布范圍窄，珠粒狀顆粒大小均一度高。目前常用的有葡聚糖凝膠、瓊脂糖凝膠、聚丙烯酰胺凝膠等。

瓊脂糖凝膠來(lái)源于一種海藻多糖瓊脂，是一種天然凝膠，不是共價(jià)交聯(lián)，所以氫鍵交聯(lián)的鍵能比較弱。它與葡聚糖不同，孔隙度是以改變瓊脂糖濃度而達(dá)到的。瓊脂糖凝膠的化學(xué)穩(wěn)定性不如葡聚糖凝膠。瓊脂糖凝膠沒(méi)有干膠，必須在溶脹狀態(tài)保存，除丙酮和乙醇外，瓊脂糖凝膠遇脫水劑、冷凍劑和一些有機(jī)溶劑即被破壞。用瓊脂糖凝膠進(jìn)行分離操作的適宜工作條件是pH4.5-9、溫度0-40℃。瓊脂糖凝膠對(duì)硼酸鹽有吸附作用，不能用硼酸緩沖液。

瓊脂糖凝膠顆粒的強(qiáng)度很低，操作時(shí)必須十分小心。另外，由于瓊脂糖顆粒彈性小，柱高引起的壓力能導(dǎo)致變形，造成流速降低甚至堵塞，所以裝柱時(shí)應(yīng)設(shè)法對(duì)柱壓進(jìn)行調(diào)整。瓊脂糖凝膠沒(méi)有帶電基團(tuán)，所以對(duì)蛋白類(lèi)物質(zhì)的非特異性吸附力明顯小于葡聚糖凝膠。在介質(zhì)離子濃度＞0.1mol/L時(shí)已不存在明顯吸附。

瓊脂糖凝膠的特征是能分離幾萬(wàn)至幾千萬(wàn)高分子量的物質(zhì)，分離范圍隨著凝膠濃度上升而下降，顆粒強(qiáng)度卻隨濃度上升而提高，特別適用于核酸類(lèi)、多糖類(lèi)和蛋白類(lèi)物質(zhì)的分離，彌補(bǔ)了聚丙烯酰胺凝膠和葡聚糖凝膠的不足，擴(kuò)大了應(yīng)用范圍。

Tanrose 4FF和Tanrose 6FF分別為4%和6%的瓊脂糖經(jīng)過(guò)乳化、漂洗、分篩而成的凝膠過(guò)濾介質(zhì)，該介質(zhì)具有良好的物理和化學(xué)穩(wěn)定性，該介質(zhì)既可采用氫氧化鈉滅菌，也可以高壓蒸汽滅菌。用于多糖、核酸、病毒、超螺旋DNA及大分子復(fù)合物的分離純化或者檢測(cè)。